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糖在植物組織培養(yǎng)中是不可缺少的,它不但作為離體組織賴以生長(zhǎng)的碳源,而且還能使培養(yǎng)基維持一定的滲透壓(一般在1.5~4.1MPa)。一般多用蔗糖,其濃度為1%~5%,也可用砂糖、葡萄糖或果糖等。
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愈傷組織的建立和增殖需要在培養(yǎng)基中添加NAA。
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無(wú)菌操作室的地面、墻壁和工作臺(tái)的滅菌可用2%的新潔爾敏或70%的酒精擦洗,然后用紫外燈照射約20min。使用前用70%的酒精噴霧,使空間灰塵落下。一年中要定期一、二次用甲醛和高錳酸鉀熏蒸。
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MS培養(yǎng)基是1962年Murashige和Skoog為培養(yǎng)煙草材料而設(shè)計(jì)的。它的特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽的濃度高,營(yíng)養(yǎng)豐富,不需要添加更多的有機(jī)附加物,就能滿足植物組織對(duì)礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)的要求,有加速愈傷組織和培養(yǎng)物生長(zhǎng)的作用,當(dāng)培養(yǎng)物久不轉(zhuǎn)移時(shí)仍可維持其生存。故這是目前應(yīng)用最廣泛的一種培養(yǎng)基。
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適當(dāng)提高瓊脂的用量可防止玻璃化的產(chǎn)生。
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某次配制的固體培養(yǎng)基未能很好地凝固,這可能是培養(yǎng)基中的pH值偏高或瓊脂用量太少等因素造成的。
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已被霉菌等雜菌污染的培養(yǎng)器皿,洗滌前應(yīng)該在121°C高溫高壓下蒸汽滅菌30min,趁熱倒去殘?jiān)?,用清水沖洗,浸泡在濃的重鉻酸鉀洗滌液中2h后取出,水洗數(shù)次,最后用蒸餾水沖淋1次。
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體細(xì)胞雜交,是以原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)為基礎(chǔ),借用動(dòng)物細(xì)胞融合方法發(fā)展和完善的一門新型生物技術(shù),是以體細(xì)胞為材料,通過(guò)物理、化學(xué)因子的誘導(dǎo)進(jìn)行融合,得到雜種細(xì)胞的過(guò)程。
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無(wú)菌操作室的滅菌無(wú)菌操作室的地面、墻壁和工作臺(tái)的滅菌可用2%的新潔爾敏或70%的酒精擦洗,然后用紫外燈照射約20min。使用前用70%的酒精噴霧,使空間灰塵落下。一年中要定期一、二次用甲醛和高錳酸鉀熏蒸。
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White培養(yǎng)基又稱(WH)培養(yǎng)基,是White設(shè)計(jì)的。其特點(diǎn)是無(wú)機(jī)鹽濃度較高。它的使用也很廣泛,無(wú)論是生根培養(yǎng)還是胚胎培養(yǎng)或一般組織培養(yǎng)都有很好的效果。
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在植物組織培養(yǎng)的器官培養(yǎng)中,常選擇0.5-1mm大小的外植體去接種,這樣組培的成功率大。
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